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    손을 잡고 가르쳐 주는 DNA 클로닝

    손을 잡고 가르쳐 주는 DNA 클로닝 4판

    • 최석용, 노현주, 이한길 저
    • 라이프사이언스
    • 2022년 01월 10일
    • 정가
      20,000원
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    ISBN: 9788961543934 244쪽 464g 188 x 257 (㎜)

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    저자 소개

    최석용, 노현주, 이한길

    저자 : 최석용

    2008 - 현재; 전남대학교 의학과 의생명과학교실 조교수, 부교수

    2005; 미국 Stony Brook University, Ph.D. (세포/발생 생물학)

    1995; 전남대학교 MD

     

    저자 : 노현주

    2012 - 현재; 충남대학교 생물과학과 부교수

    2005 - 2012; NIH-NICHD 박사 후 연구원

    2003; 충남대학교 동물학 Ph.D.

     

    저자 : 이한길

    2013 - 현재; 충남대학교 생물과학과 조교수

    2012 - 2013; Molecular Plant Pathophysiologist, Monsanto Company

    2008 - 2012; 박사 후 연구원 (Washington University in St. Louis and Donald Danforth Plant Science Center)

    2008; Washington University in St. Louis (US), Plant Biology Program in Division of Biology and Biomedical Sciences, Ph.D.

    목차


    1 클로닝이란? 1
    1.1  클로닝의 정의 2
    1.2  새로운 유전자의 발굴 3
    1.3  과거의 클로닝 5
    1.4  현재의 클로닝 6

    2 클로닝을 위한 준비 9
    2.1  클로닝 설계에 유용한 소프트웨어 10
    2.2  벡터, 플라스미드, 컨스트럭트 & 코작 염기서열(Kozak consensus sequence) 13
    2.3  MCS(Multiple Cloning Site) 18
    2.4  제한효소(Restriction Enzyme, RE)와 스타활성(star activity) 22
    2.5  아가로즈 젤 전기영동을 이용한 DNA 분석 29
    2.6  LB(Luria-Bertani) 플레이트 만들기 34
    2.7  Competent Cell 37
    2.8  DNA의 질량을 mole 수로 바꾸는 법 41
    2.9  새로운 플라스미드를 받았을 때 42
    2.10  cDNA 라이브러리 44

    3 클로닝 첫걸음 47
    3.1  Cut & Paste 48
    3.2  DNA 염기서열분석 & direct 염기서열분석 61
    3.3  클로닝을 위한 PCR & nested PCR 65
    3.4  Fill-in(Full & Partial) 77
    3.5  상보적인 점착말단(Compatible Cohesive End) 83
    3.6  메틸화(Methylation) 85
    3.7  세 절편 연결(Three-piece ligation) 93
    3.8  위치지정 돌연변이(Site-directed mutagenesis) 96
    3.9  TA 클로닝 & T-벡터의 제작 102
    3.10  TOPO TA 클로닝 108
    3.11  Gateway 클로닝 110
    3.12  식물 형질전환(Plant transformation) 벡터의 구조 114
    3.13  Rhizobium radiobacter 형질전환 117

    4 클로닝 다음 걸음 119
    4.1  유전자 중간 부분에 다른 DNA를 삽입(insertion)하는 방법 120
    4.2  유전자 중간 부분을 삭제(deletion)하는 방법 124
    4.3  유전자에 에피톱 택을 삽입하는 방법 & CRISPR/Cas9 126
    4.4  번역융합(Translational Fusion) vs 전사융합(Transcriptional Fusion) 133

    5 클로닝으로 인한 두통을 덜어주는 방법 135
    5.1  Golden gate assembly & Golden gate를 이용해 푸는 직소퍼즐 136
    5.2  In-Fusion SLIC(In-Fusion Sequence-and Ligation-Independent Cloning) 142
    5.3 ‌ T4 DNA Pol SLIC
    (T4 DNA Polymerase Sequence-and Ligation-Independent Cloning) 153
    5.4  RE-free SLIC 159
    5.5  EMP(Exponential Megapriming PCR) 클로닝 161
    5.6  MRF(Modified Restriction Free) 클로닝 165
    5.7  Non-template PCR 클로닝 168
    5.8  cDNA 합성 의뢰 171

    6 클로닝 마지막 걸음 173
    6.1  다른 종에서 유사한 유전자(homolog)를 클로닝하는 방법 174
    6.2  RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends) 178
    6.3  BAC 재조합 181
    6.4  Old Trick: 부분절단 185
    6.5  벡터의 변경 187
    6.6  클로닝이 다 됐다고 생각했는데 틀이동 돌연변이가 있을 때 191
    6.7  클로닝의 실제: 억세게 운이 없는 경우 193

    7 클로너에게 주는 조언 205
    7.1  클로닝이 안 될 때 206
    7.2  클로닝의 정리와 기록 209

    심화학습을 위한 문헌 213
    약자 215
    찾아보기 217

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